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柯勒照明法常見問題解決方案

發布時間:2020/3/11 點擊量:181

柯勒照明法常見問題解決方案

    當前配備顯微攝影裝置的顯微鏡,其照明設施與整個光路幾乎都是按照柯勒照明法的要求設計生產的,操作程序比較簡單也易於掌握,調整程序如下:
    1)首先將待檢切片置於載物台,用4×或10×物鏡調準焦點,目的是確定載物台的位置(此步很重要,必須先行,否則影響柯勒照明的正確調整;
    2)再將台下聚光鏡的孔徑光闌與視場光闌收縮到zui小位置。如果聚光鏡設有附加錐光透鏡,應將此透鏡移入光路;
    3)用台下聚光鏡的升降旋鈕,上下移動聚光鏡,使視場光闌的影像清晰地呈現在標本平麵上;
    4)旋轉台下聚光鏡上的兩個定心旋鈕,將視場光闌的影像調整到視野中心位置處—光學合軸;
    5)需要特別注意的是:在光學合軸之前,必須先進行顯微鏡機械軸的合軸調整,認真檢查物鏡、聚光鏡安裝定位是否正確;
    6)調整視場光闌和孔徑光闌到適當位置。
    用柯勒照明觀察標本時,在視野內見不到燈絲的影像,所以整個視野內亮度非常均勻,溫度也低不會損壞標本。而均勻的照明是顯微攝影時重要條件之一。缺點是視野內亮度較臨界照明弱一些。
    柯勒照明也有一些常見的問題,以下為解決方案:
    1)红杏视频看片软件app曾見到一些使用顯微鏡的部門,從未按柯勒照明法的要求照明係統,甚至在沒有光學合軸的情況下,就進行顯微攝影。結果因為視野內的亮度明顯不均勻,所拍攝的相片整個畫麵的密度也深淺不一。應按上述步驟認真調整,這是顯微攝影必須掌握的基本操作技術。
    2)柯勒照明調整好後,聚光鏡的位置就應固定不動,不能隨意升降。有人采用將聚光鏡降低的方法,認為這樣可增加影像的景深和反差。這種操作方法是有害的,因為它首先破壞了柯勒照明,會使視野內照明不均勻。再者,他降低了數值孔徑的利用,必將降低物鏡的分辨能力。以此為代價來換取影像的所謂景深和反差,是極不可取的。
    3)影像清晰差時,應查找各方麵因素,絕不能降低聚光鏡的方法解決:如:視場光闌與孔徑光闌是否過大,應按所用物鏡的要求進行調整;物鏡與載玻片、蓋玻片表麵是否有汙物,必須清潔幹淨;切片不符合要求,過厚、染色過淡應重新製作符合顯微攝影標準的切片;物鏡的光行差校正程度差,顯微攝影應選用平像場複消色差物鏡等。
    4)聚光鏡升降鈕比較靠近調焦旋鈕,在調焦時經常誤將聚光鏡升降鈕旋轉,從而破壞了柯勒照明。因此特別強調,每次拍攝前都必須檢驗柯勒照明是否正確。檢驗方法很簡單,隻需重複(2)(3)兩步操作即可。聚光鏡如已移位,應再次調整。
    5)為選擇拍攝部位和適當的放大倍率,需要經常轉動物鏡轉換器,換用不同倍率的物鏡。但經常發生物鏡轉換器轉換不到位的情況,機械軸被破壞,致使光學軸無法調整。這也是不正確使用顯微鏡的常見現象,必然影響成像質量。隻要堅持每次拍攝前檢驗柯勒照明,就能立即發現物鏡不到位的差錯,要記住機械合軸是光學合軸的基礎。

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